骨髓增殖性肿瘤（MPNs）是一类以成熟髓系细胞的过度生成为特征的克隆性造血干细胞疾病，主要受到JAK2、CALR等基因突变的驱动，进而导致JAK/STAT通路的过度激活。目前的治疗手段，如羟基脲和芦可替尼，虽然能够缓解症状，但并不能完全消除恶性克隆，并且存在耐药性和全身毒性的副作用。此外，骨髓微环境的复杂以及药物靶向递送的障碍，使得治疗的难度进一步加大。AG百家乐今天分享的研究论文，发表在《Journal of Nanobiotechnology》上，标题为“通过靶向骨髓的工程化外泌体抑制USP5用于骨髓增殖性肿瘤治疗”。该研究揭示去泛素化酶USP5在JAK2V617F突变的间充质干细胞中高表达，其通过抑制Caspase3介导的凋亡促进细胞的异常增殖，是MPNs进展的关键调控因子。为实现USP5抑制剂（USP5-IN-1）的靶向递送，研究团队构建了一种共表达CXCR4和P-选择素靶向肽的工程化外泌体（USP5@Exosome-CP），旨在提高MPNs的治疗效果并降低脱靶效应。

在研究中，MPN小鼠模型的实验流程揭示了调控MSC增殖的去泛素化酶筛选。具体而言，研究者通过CD117磁珠从正常小鼠和JAK2V617F突变小鼠的骨髓中分选出间充质干细胞，并提取其mRNA进行逆转录合成cDNA。通过包含86种去泛素化酶的引物库进行QPCR筛选，发现与正常MSCs相比，Mut-MSCs中USP5和USP8的mRNA表达显著上调。在西方印迹法验证中，USP5和USP8蛋白的表达与上调的mRNA水平一致，同时Mut-MSCs中的Caspase3表达较低，敲低USP5或USP8显著上调Caspase3。此外，流式细胞术的结果表明，抑制USP5或USP8可有效抑制Mut-MSCs的增殖。这些发现表明USP5是一种调控Mut-MSCs异常增殖的重要去泛素化酶，成为MPNs潜在的治疗靶点。

接下来的分析与急性髓系白血病（AML）患者的疾病进展相关，数据显示USP5的mRNA在AML患者中普遍高表达。而且USP5的高表达与肿瘤微环境中PD-L1、PD-1等免疫抑制分子的高表达密切相关。这进一步提示USP5在髓系恶性肿瘤中的潜在调控作用。

此外，USP5@Exosome-CP的制备及表征显示，工程化外泌体成功实现了骨髓特异性递送。在流式细胞术和共聚焦显微镜的检测中，Exosome-CP对炎症BMEC的摄取效率显著高于正常BMEC。Transwell模型的结果表明，Exosome-CP能够高效穿透炎症BMEC屏障，并对Mut-MSCs具有特异性靶向能力。

在生物分布的研究中，通过荧光成像发现USP5@Exosome-CP在骨髓中的积累显著高于未修饰外泌体，且在12小时达到峰值富集。免疫荧光显示USP5@Exosome-CP与骨髓中c-kit+Mut-MSCs强烈共定位，证实其在靶向递送中的高效性。

最后的治疗效果研究表明，通过向MPN小鼠尾静脉注射USP5@Exosome-CP，能够显著降低肿瘤负荷，且该组小鼠的生存率显著高于其他组，显示出该策略在 MPDs 的治疗潜力。总的来说，这一研究彰显了USP5在MPNs治疗中的价值，并为骨髓微环境的靶向治疗提供了新的思路与方法。

综上所述，USP5@Exosome-CP不仅有效抑制了MPNs的进展，而且在延长生存期方面表现出良好的效果且低全身毒性，非常适合进一步的临床应用研究。为实现疾病治疗提供了新的视角，同时也为AG百家乐在生物医疗领域的创新发展奠定了良好基础。